第 8 章：细胞迁移的 3D 生物打印（3D Bioprinting of Cell Migration）

引言（Introduction）

在所有组织工程技术中，3D 生物打印（3D bioprinting）可以说是目前在体外获得生物相关（biorelevant）模型的最复杂、功能上也最准确的方法之一。要成功构建一个组织模型，3D 生物打印需要多学科协作的能力——涵盖工程学、细胞生物学、材料科学与医学等领域，每一个环节都对最终产物的优化有所贡献。与传统的二维单层细胞培养相比，3D 生物打印能够在体外构建出更接近体内（in vivo）真实环境的模型。它通常依据仿生学（biomimicry）的原理，将细胞、生物材料和培养基等生物学组分逐层沉积，从而构建出三维组织结构。在细胞迁移研究领域，3D 生物打印模型已有诸多应用：研究健康与疾病状态下的细胞迁移生物学通路，检验药物及其他治疗策略对细胞迁移行为的纠正效果，以及评估拟植入物（constructs）的适配性。虽然 3D 生物打印的工艺具有一定灵活性，可以调节多种参数，但仍存在一套典型的工作流程，可帮助研究者获得最理想的结果。

本章将首先介绍 3D 生物打印的相关性与原理，重点解读典型生物打印工作流的主要阶段，包括模型设计、打印设计、模型制造、模型培育和应用；接着聚焦于三种主流的 3D 生物打印工艺——激光诱导前向转移、喷墨打印和机器人分配——并指出它们各自的最佳工作参数；随后介绍这些技术所建立的迁移研究 3D 生物打印模型，以癌症、皮肤和肌肉组织仿生体为例，展示该领域的最新进展。

3D 生物打印工作流程概述（3D Bioprinting Workflow）

与其他三维生物制造方法类似，3D 生物打印的起点是对目标组织的理论模型进行设计，需要谨慎选择细胞与聚合物，使模型尽可能地复现目标组织。在打印设计（print design）阶段，研究者需要借助一个计算机化的 3D 模型，将生物墨水（bioink）准备好之后发出打印指令，进入正式的模型制造（model fabrication）步骤。如果需要交联（curing），会在打印完成后进行；随后，模型被转入一个预先设定的、与生理条件相符的培养环境中进行模型培育（model propagation），以增强其功能性，最后才能进入应用阶段。本节将按照这一时间顺序，逐一讨论 3D 生物打印迁移模型制作流程中的各环节。

模型设计（Model Design）

构建一个 3D 生物打印迁移模型的首要关键步骤，是选择合适的细胞与聚合物材料，从而在功能上尽可能模拟目标微环境。在设计细胞组分时，需要考虑多种因素：细胞可以来源于不同物种（例如人、小鼠、仓鼠），可以是已建立的细胞系，也可以是从组织中初次分离的原代细胞，并具有特定的分化状态（已分化或未分化）。同时，研究者还可以根据研究目标所需的复杂度，自由决定引入多少种不同的细胞类型。所有实验设计都需要牢记一点：所设计模型的关键要素必须尽可能与体内系统一致。例如，当设计一个 3D 迁移性皮肤模型时，必须对人体皮肤的解剖结构有充分了解——细胞密度、空间分配等细节，都是构建组织仿生体时不可忽视的因素。

在模拟细胞外基质（ECM）的部分，研究者可以选择多种生物材料作为细胞支架，从而评估细胞迁移行为。生物聚合物水凝胶（biopolymer hydrogels）是 3D 生物打印中最常使用的材料，原因不仅在于它们在结构上与天然 ECM 高度相似，更在于其化学和机械特性都可调，使模型制造过程具有更大的自由度。生物聚合物水凝胶被定义为来自或提取自生物体、由高度组织化的内在网络构成的吸水膨胀聚合物，常见的有两类：一类是蛋白质类水凝胶，如胶原蛋白（collagen）、明胶（gelatin）和基质胶（Matrigel），来源于动物组织；另一类是多糖类水凝胶，如海藻酸钠（sodium alginate）、结冷胶（gellan gum）、果胶（pectin）和琼脂糖（agarose），分别来自海藻、细菌发酵副产物以及柑橘果皮。蛋白质类水凝胶通常有助于细胞附着，因为它们天然含有 RGD 复合物（即由精氨酸–甘氨酸–天冬氨酸组成的三氨基酸序列）；多糖类水凝胶则在化学结构上与天然组织中的糖胺聚糖（glycosaminoglycans）相似，能够提供结构支撑并保有等效的含水量。实际使用时，常会将多种聚合物共混，以同时获得两类的特性，并弥补单一聚合物的不足。3D 生物打印模型的整体目标是反映体内发育组织的生物相容性（biocompatibility）、可降解性（biodegradability）、机械特性和支架结构。因此，对于那些体内对应组织富含胶原型 ECM 的模型，应鼓励引入胶原蛋白以构建具有生物相关性的 ECM 样环境。模型也可以由合成水凝胶（如聚酰胺和聚乙二醇）合成，但这类材料通常生物相容性较差，因为其化学结构与天然组织相差更远。

打印设计（Print Design）

3D 模型的打印设计通常包括两个步骤：（1）成像数据的获取，以及（2）三维模型的重建。在成像阶段，需要准确理解目标组织的结构，使模型的尺寸和性能尽可能在功能上得到增强，并尽可能贴近真实结构。解剖数据可以通过多种成像技术获得，而成像软件的选择则因情境而异。例如，对于骨和肿瘤等硬组织的成像，构建 3D 仿生组织时更适合使用计算机断层扫描（CT）；而磁共振成像（MRI）则更适合软组织的评估。成像过程中还需要考虑目标组织的可及性、成像分辨率以及可能存在的辐射暴露风险。如果 3D 迁移模型的设计并不需要如此广泛的成像数据，而是更简单的模型即可满足需求，计算机辅助设计（CAD）软件则是获取 3D 模板的便捷工具。利用 CAD 软件，可在模型中引入内部轮廓、孔洞、通道等特征，便于细胞附着、迁移和营养物流通。

模型在计算机中建立之后，需要将数据转换成 3D 生物打印机可识别的语言，具体涉及建模与切片软件。首先，三维模型被渲染成符合 STL（stereolithography）文件格式的输出，这一格式通过一系列表面镶嵌（surface tessellation）来描述几何体的表面，便于识别。接下来，STL 模型被转换为一系列水平切层（slice），3D 生物打印机基于这些切层，按照增材制造（ALM）的原理逐层挤出材料。通常，STL 切片文件还需要进一步转换为 G-Code 格式，使文件语言与生物打印机相兼容。G-Code 由一系列字母和数字组成的指令构成，每一个指令对应一个打印机功能，例如控制阀门的开关时间以协调材料挤出，或将打印头移动到打印平台的特定位置。以 INKREDIBLE 3D 生物打印机（瑞典 Cellink 公司）为例，指令 M760 用于打开打印头 1 的阀门，指令 G1 X1.236 Y4.611 E0.01212; perimeter 则将挤出机线性移动到给定的 X、Y、Z 坐标位置。根据生物打印机类型的不同，某些参数（如模型填充图案、填充密度、打印温度、速度以及是否需要悬垂支撑材料等）可以通过代码内置；而另一些生物打印机则需要在打印前通过手动操作进行设定。一旦 3D 模型建立完成、打印路径完全确定，就可以开始配制生物墨水、设定其他打印参数，并启动 3D 生物打印。

模型制造（Model Fabrication）

模型制造阶段主要包括两个关键步骤：生物墨水的配制和正式的 3D 生物打印。生物墨水的配制流程在所有 3D 生物打印平台上大体相似，但生物墨水的沉积操作因生物打印机的类型和厂商不同而有所差异。在模型设计阶段所选定的聚合物材料和细胞，会在无菌条件下按照特定的聚合物浓度和细胞密度混合。可以将多种聚合物和细胞类型混合成一种生物墨水，也可以安装多个装有不同生物墨水配方的料筒，从而在单个迁移模型中再现天然组织的复杂异质性。装有生物墨水的料筒被放入打印机后，需要根据打印平台对沉积出口进行校准，以确保模型尺寸的准确性。沉积速率（以流量或挤出压力设定）与生物墨水的黏度、打印速度和挤出喷嘴的内径直接相关。

然而，生物打印中存在两个主要矛盾：提高打印保真度（print fidelity）往往以牺牲细胞活力为代价，反之亦然。使用高黏度的生物墨水有助于改善打印形状，但挤出过程所需的高打印压力会使悬浮细胞承受较大的局部剪切力；低黏度的生物墨水更有利于保持细胞活力，但沉积在平面上的模型会很快失去形状。可以通过调节若干打印变量来优化材料参数（包括水凝胶特性和凝胶化）、打印参数（包括喷嘴规格、打印压力和打印速度）以及收集平台（可以是平坦表面或支撑凝胶悬浮）。生物打印在迁移模型制造中具有高度的灵活性——通常应先调整打印参数和收集平台，再调整材料参数，以避免损害原本设计用于匹配目标组织的理化和机械特性。

也许最有效的、可以同时兼顾打印保真度和细胞活力的方法是使用嵌入式生物打印（embedded bioprinting），即采用一个支撑性的收集平台。这一技术使用一个牺牲性的储液池，生物墨水在其中被挤出，使模型在凝固并从支撑床上取出之前能够保持溶液状态下的形状。带电聚合物（如海藻酸盐、果胶和结冷胶）可以通过注射二价阳离子（例如钙离子溶液）进入支撑床，并在模型内部扩散实现交联。这一技术能够使用低黏度的前驱体溶液打印出更复杂、更具形状特异性的结构，且不限制构建方向、支撑或悬垂部分，细胞活力得以高度保留，并允许多层生物墨水的复合，从而使天然组织的复杂层级结构得以有效呈现。目前嵌入式打印技术常用的支撑凝胶包括明胶、Carbopol 和琼脂糖，其中琼脂糖被认为最具应用前景，原因在于其惰性、流变特性以及适合细胞培养的常温范围。

模型培育（Model Propagation）

3D 打印模型所处的培养条件也是生物打印过程中至关重要的一环，因为 3D 打印件所处的环境会显著影响其作为迁移模型的代表性。在此阶段，组织模型被置于特定的生化与物理线索下，以模拟健康或疾病状态下的体内环境，直至模型达到使用要求。以间充质干细胞（mesenchymal stem cell）的培养为例：当细胞暴露于 IBMX（异丁基甲基黄嘌呤）、吲哚美辛和地塞米松时，可通过激活 PPARγ（过氧化物酶体增殖物激活受体）启动脂肪生成；相反，当细胞暴露于临界水平的 β-甘油磷酸钠、抗坏维素（抗坏血酸）和地塞米松时，可通过细胞外相关激酶磷酸化诱导成骨基因表达。物理环境也可以被调节，例如将氧浓度调至与某些肿瘤核心的缺氧环境一致，或将角质形成细胞培养在气–液界面以模拟体内表皮的传播。对于那些天然承受机械载荷的组织（如肌腱和韧带），对肌腱细胞和纤维细胞施加机械力可以维持其表型和分化状态。

应用（Application）

3D 生物打印的四大主要应用领域包括药物发现、化妆品测试、组织建模/再生以及医疗器械。这些应用同样适用于研究 3D 迁移，并且可以绕过动物实验的必要性。借助 3D 生物打印，可以构建具有代表性的组织模拟三维环境，不仅有潜力缓解器官捐献短缺，还可以用于应对医疗器械方面尚未满足的需求。3D 生物打印迁移微环境的主要研究领域包括癌症、皮肤、血管生成和肌肉模型。这些领域的具体例子将在本章后半部分作为 3D 迁移模型的实例进行讨论；但在此之前，需要先详细讨论生物打印领域内最主要的三种技术。

激光诱导前向转移（Laser-Induced Forward Transfer）

又称激光辅助 3D 生物打印（LIFT），其原理是将激光脉冲聚焦到玻璃带的吸收层上，产生高压气泡，从而将生物墨水推向收集基底。激光诱导前向转移具有很高精度，能够制造微米甚至纳米尺度的组织支架，因此在分辨率方面是三种技术中最具优势的。

然而，这一技术的耗时对组织模型可能存在潜在的不利影响：复杂或较大的结构需要更长的打印时间，因此可能需要原位交联以防止结构塌陷。该打印方式兼容多种材料黏度，并能在同一步骤中处理固态与液态供体膜。尽管 LIFT 已有诸多进展，但过高的激光功率会因热损伤对细胞活力产生不利影响。整体而言，这种无喷嘴的方法能够沉积高密度细胞，但其高昂的成本与较慢的打印速度，是目前构建更大、临床相关 3D 模型的主要制约因素。

喷墨打印（Inkjet Printing）

在生物制造领域，喷墨打印指的是将少量生物墨水通过小孔以高精度沉积到收集基底上（也称按需滴落，drop on demand）。该技术源自商用二维喷墨打印机，可进一步分为两种工作模式：热喷墨打印和压电喷墨打印。热喷墨打印通过对打印头进行电加热产生蒸汽气泡，从而形成生物墨水的液滴并沉积；压电喷墨打印则通过压电致动器施加交变电流，使喷嘴产生机械振动并诱导液滴形成。

喷墨打印最大的优势之一是 3D 打印模型的快速凝胶化时间，同时具备足够的分辨率和打印速度，但仅适用于低黏度材料。细胞活力也可能受到影响，原因在于喷嘴孔径与细胞本身相差不大；尤其是热喷墨打印还会对沉积细胞产生额外的热应激。综上所述，喷墨打印法适合用于以远低于 LIFT 的成本生产较小结构，但要构建更大尺寸、临床相关尺度的模型时，同样会面临挑战。

机器人分配（Robotic Dispensing）

也称为挤出式生物打印（extrusion bioprinting），由于其连续挤出特性而得名。机器人分配式 3D 生物打印机可以采用气动、活塞或螺杆方式进行沉积。在打印可临床转化、且在合理时间窗口内可完成的模型时，这种打印方式被认为是最有前景的。机器人分配可适应多种材料黏度，但分辨率通常低于 LIFT 和喷墨打印。活塞驱动的沉积通常对沉积过程具有更好的控制能力，因为气动系统可能在压缩气体输送上存在延迟；而螺杆分配在喷嘴处可能产生更大的压力降，这对悬浮中的细胞来说可能是问题。

3D 生物打印的细胞迁移模型概述（3D Bioprinted Models of Cell Migration）

近年来 3D 生物打印技术取得了跨越式进展，复杂迁移系统的设计与制造已在多个应用领域得以实现。这些进展加深了我们对生物墨水中适用材料、细胞和生物活性分子的认识，同时也推动了相关打印技术的进步，使模型制造变得更加可及和可行。本节将展示 3D 生物打印细胞迁移研究的当前最先进进展，分别以癌症、皮肤和肌肉三类三维迁移系统为例，而这些模型都是基于 LIFT、喷墨或机器人分配三种技术开发而来。

癌症（Cancer）

由于癌症的高发病率、高死亡率及其经济影响，它仍然是一项重大的临床未满足需求。正因如此，癌症是一个研究极为广泛的领域，而 3D 生物打印是一项能在体外打印出 3D 癌症模型的关键技术，目的是更好地理解癌细胞的迁移机制，进而寻找阻止癌细胞侵袭和增殖的方法。

3D 生物打印在癌症迁移研究中的进展涵盖多种癌症病理、多种打印技术与多种迁移材料，且都达到了较高水准。其中一个例子是采用按需滴落式 3D 生物打印，生成与乳腺癌、肺癌和卵巢癌相关的通用迁移模型。该高通量系统利用具有特定硬度和肽（RGD）含量的水凝胶，评估不同微环境对癌细胞迁移的影响，从而定义其底层生物学机制并寻找新的治疗选择。研究显示：非侵袭性乳腺癌细胞（MCF7）在不同硬度和肽含量的水凝胶中生长情况相似，而侵袭性乳腺癌变种 MDA-MB-231 仅在呈现 RGD 的水凝胶（与硬度无关）中具有高增殖性。关于迁移行为，MCF7 在 Matrigel 中形成多个球体，增殖能力更强；MDA-MB-231 高度侵袭，呈现星状、有突起的形态，并可持续 7 天。这一结果也通过上皮样细胞的 E-钙黏蛋白（E-Cadherin）染色与间充质细胞的波形蛋白（vimentin）染色得到进一步验证。最后，使用 ROCK 抑制剂（rho 相关蛋白激酶抑制剂，常用于抑制肿瘤转移）可显著降低 MDA-MB-231 的迁移距离与速度，相较未处理的对照有明显的抑制效应。

在使用气动挤出的机器人分配方面，研究者评估了 3D 生物打印共培养的神经母细胞瘤（IMR5）球体和内皮（HUVEC）细胞，发现细胞间相互作用会促进实体瘤的侵袭行为，表现为共培养组的迁移指数高于单独球体培养组。该研究以 GelMA 作为代表性肿瘤 ECM，以 Carbopol 作为支撑性嵌入式介质，构建出可灌注的血管通道，以再现动态肿瘤微环境。共培养时，神经母细胞瘤与 HUVEC 的细胞间相互作用显著增强，神经母细胞瘤细胞向 GelMA 组织迁移明显，HUVEC 则向肿瘤缺氧区域浸润，提示肿瘤细胞与血管之间存在相互作用。

选择激光直写（laser direct-write）路径的研究者则聚焦于构建乳腺癌细胞入侵脂肪组织仿生体，并评估肥胖对乳腺癌风险的生理贡献。乳腺癌细胞（MCF-7 或 MDA-MB-231）被包埋于海藻酸盐–胶原微珠中，这些微珠被进一步嵌入含有脂肪来源干细胞（ASC）的基质中，ASC 取自健康 BMI 或超重 BMI 的绝经后女性妇女。14 天的观察显示，与高 BMI 脂肪细胞共培养的乳腺癌细胞发生了跨微珠的迁移和增殖，并进入周围基质；而与健康 BMI 脂肪细胞共培养的乳腺癌细胞（特别是 MCF-7）则被局限在海藻酸盐–胶原微珠内。此外，这些癌细胞对上皮–间充质转化（EMT）标志物 E-钙黏蛋白、β-连环蛋白和腱糖蛋白 C（tenascin C）呈阳性，提示细胞迁移能力增强。

皮肤（Skin）

由于皮肤是一个动态而复杂的结构，皮肤模型同样需要具有相当的复杂度，而 3D 生物打印是构建这种结构的理想方法。在皮肤创伤后的自然愈合阶段，成纤维细胞会迁移并重塑下方的真皮层，内皮细胞穿越基质形成新生血管，角质形成细胞则在一系列精细而协调的事件中覆盖伤口表面。目前已有多个 3D 生物打印皮肤组织的例子，其中绝大部分模拟了表皮和真皮部分，更精细的模型还会加入皮下层（hypodermal/subcutaneous）。3D 生物打印皮肤迁移系统通常采用机器人挤出式生物墨水——这是因为生成临床相关尺寸的模型需要较大的厚度，而其他生物打印技术在这方面的能力相对有限。为了研究 3D 生物打印皮肤以及随后的细胞行为（如迁移），已有研究利用悬浮层增材制造（SLAM）方法构建了一个多腔室皮肤类似物，包含表皮、双腔真皮（乳头层和网状层）以及皮下层。利用机器人挤出式 3D 生物打印，将含有角质形成细胞、人真皮成纤维细胞和脂肪间充质干细胞的三细胞培养物按空间分配到真皮腔室，所用生物聚合物包括果胶和胶原，再将打印结构植入模拟的猪体外伤口模型。结果显示，植入物与周围猪组织之间发生了整合，伴随相关细胞在植入物基质与猪基质之间的迁移。

另一个非常值得关注、且越来越常见于临床转化研究的皮肤生物打印方法，是直接在患者创面上进行原位生物打印（in situ bioprinting）。结合创面成像技术，研究者探索了将自体或异体真皮成纤维细胞与表皮角质形成细胞精确递送至损伤区域，以替代皮肤的层次结构。基于喷墨式生物打印机，使用纤维蛋白–胶原水凝胶作为载体的生物打印细胞已被证实可以促进并加速伤口闭合与上皮化，使细胞在伤口环境中增殖并迁移。该研究表明，这类方法不仅可应用于全层伤口，还有潜力用于烧伤、溃疡乃至深度组织损伤。

肌肉（Muscle）

在胚胎期肌生成过程中，骨骼肌成肌祖细胞通过定向细胞迁移形成四肢、膈肌和舌的原基。然而，出生后骨骼肌受损时，肌纤维的再生是通过招募肌肉卫星干细胞实现的。同种异体或自体的细胞治疗（通过肌内或血管内注射移植细胞）可用于辅助肌肉组织修复，但患有影响多块大肌肉的退行性疾病的患者并不总能获得功能上的恢复。这种失败的主要原因在于供体细胞无法迁移，因此研究者投入了大量时间来研究肌源性干细胞/祖细胞迁移的机制。

其中一个研究是利用机器人微挤出技术在 GelMA 上进行微图案化，以评估成肌细胞的迁移行为。具体而言，将 C2C12 小鼠成肌细胞接种到以平行、垂直线和指纹图案生物打印的 GelMA 上，以评估定向集体细胞迁移。研究者以迁移距离、迁移速度和方向性作为指标考察细胞迁移行为。在此基础上，研究者进一步生成肌管，并证明其在电刺激下具有收缩能力。该技术的生理学实用性还通过构建可模拟人虹膜的放射状和环形肌肉纤维得到进一步证明——这些纤维能够在外部刺激下功能性收缩并控制瞳孔孔径。研究还制作了真实尺寸的生物打印盘以模拟虹膜，并且生物工程化的放射状肌肉纤维取向角分布与体内环境高度一致。

另一项研究聚焦于在小鼠皮下植入大鼠肌肉、进而评估治疗人体大尺寸骨骼肌损伤的可行性，研究者利用从人肌肉组织活检中分离的肌肉祖细胞构建了人体尺度的骨骼肌结构。这些细胞被悬浮于纤维蛋白原、明胶、透明质酸和甘油的混合液中作为生物墨水，使用气动挤出打印，并随后用专门定义的培养基诱导肌纤维形成。最终打印出的肌肉组织仿生体具有天然肌肉的特征——多层肌纤维经细胞迁移和组装形成空间有序的肌束。这些结构随后被成功植入大鼠体内的肌肉缺损处，并观察到血管化与肌肉功能的恢复。该研究表明，对天然组织结构的认识可以用于 3D 生物打印精细的组织复制品，从而实现对细胞迁移的监测和操纵，并服务于多种应用。

本章个人批注

本章以一张"细胞迁移的 3D 生物打印"为题，把原本散见于材料学、组织工程学和再生医学的概念，集中组织到一条"工作流程 + 打印技术 + 迁移模型应用"的主线里。读完让我印象最深的是"打印保真度与细胞活力之间的张力"——作者把它视为整个 3D 生物打印工艺的核心矛盾，并以嵌入式打印（SLAM 等）作为一种"软着陆"的工程方案。这种把技术约束用生物相关性来调和的思路，与一般"打印精度越高越好"的直觉非常不同，对于细胞迁移研究来说尤其重要：迁移本身就是细胞对机械和生化线索响应的过程，剪切力与基质硬度这两个变量会直接改写实验结论。

另一个值得记住的细节是，作者反复强调"目标组织 → ECM 选择 → 细胞来源 → 物理化学参数"是一条单向的设计链——这条链上的每一个决定都会向下游传递，并最终影响打印可行性。这与本书前面几章强调"细胞迁移依赖微环境"的论点是吻合的：3D 生物打印本质上是在体外重建一个受控的微环境，并用这个微环境去研究细胞迁移，而不是直接用生物墨水"画"出迁移行为本身。

需要注意：本章引用了大量具体的打印平台、聚合物浓度和细胞系名称（如 MCF-7 vs MDA-MB-231 的对照、ROCK 抑制剂、GelMA + Carbopol 支撑体系等）。这些细节在原文中都标了参考文献编号，我并未逐一核对原文引用是否准确；后续若要做基于本章的实验设计，应当回到原始文献 (Jung et al. 2021、Ning et al. 2022、Vinson et al. 2017、Du et al. 2019、Kim et al. 2018) 来核对参数，而不应直接复用本笔记中的数字。

与上下章的衔接（一段话）

本书前几章（第 1–7 章）从生物学视角系统介绍了细胞迁移在发育、免疫、伤口愈合、癌症等情境下的发生机制及其研究方法；本章则将视角切换到工程学一侧——3D 生物打印作为一个相对成熟且可调控的技术平台，被作者用来同时回答"如何体外模拟迁移"与"如何用这种模拟来干预迁移"两个问题。在结构上，本章位于"方法篇"的最后一节（第 8 章，紧接第 7 章"研究细胞迁移的方法"），起到承上启下的作用：第 7 章侧重于迁移研究的经典成像与分子生物学方法，第 8 章则把这些方法的目标——"在体外构建具有生理相关性的迁移微环境"——作为 3D 生物打印的应用场景展开，因此可以视为第 7 章的工程化延伸。下一章（第 9 章"高分辨率体外成像"）将回到成像方法本身，与本章在"如何观察 3D 模型中的细胞迁移"这一点上形成衔接：第 8 章提供了模型，第 9 章将提供对这些模型的观察手段。