第 13 章：环磷酸腺苷信号通路（Cyclic AMP Signaling）

13.1 Introduction

Sutherland 和 Rall 在 1958 年首次把 cAMP 鉴定为第二信使（second messenger），从那以后 cAMP 被发现介导多种细胞类型的广泛生理反应。在血管平滑肌细胞（VSMCs）中，cAMP 是介导血管舒张反应的关键第二信使；多种神经递质与激素——例如 β2 肾上腺素受体激动剂、prostacyclin (PGI2)、PGE2、PGD2、组胺、血管活性肠肽（VIP）——都通过 cAMP 通路引起舒张。cAMP 的来源是 ATP：ATP 经腺苷酸环化酶（adenylyl cyclase, AC）催化生成 cAMP，副产物为焦磷酸。cAMP 引起血管舒张主要通过激活 cAMP 依赖性蛋白激酶（PKA）这条经典途径实现；除 PKA 外，cAMP 还能通过两个非经典下游——cAMP 直接激活的交换蛋白（Epac）与环核苷酸门控（CNG）通道——影响血管张力，这两条支路在 cAMP 介导舒张的复杂调控网络中提供了 PKA 之外的并行机制。

13.2 ACs

AC 共分 6 大类（I–VI），催化同一反应，但来自彼此无序列与结构同源性的不同基因家族。所有哺乳动物 AC 都属于 III 类，由一段约 200 个残基的保守催化结构域定义。该类 AC 又分为 10 种：9 种跨膜型（tmAC；AC1–9）和 1 种可溶型（sAC；AC10）。tmAC 由两簇各含 6 个跨膜（TM）结构域的区段（TM1 与 TM2）构成；TM1 和 TM2 由一段胞内环连接，胞内环中含 C1a 与 C1b 区段；TM2 后接一段长胞内尾，尾内依次含 C2a 与 C2b 区段。C1a 与 C2a 高度保守，集中了几乎全部催化元件；二者彼此形成异二聚体，活性位点由 C1a 和 C2a 共同在界面上构成，因此两个催化结构域以正确取向结合是催化活性的前提。可溶型 sAC 在一条肽链上依次携带 C1 与 C2 两个催化结构域，随后是约 1100 个残基的 C 端区段——该区段可能起抑制剂作用；与 tmAC 类似，C1 和 C2 的二聚化同样是 sAC 催化活性所需。

tmAC 的活性受多种与催化结构域相互作用的蛋白质调控，而目前尚未发现 sAC 的调控蛋白。tmAC 的主要调控者是异源三聚体 G 蛋白，后者本身在 G 蛋白偶联受体（GPCR）激活后被启动：所有 tmAC 同工酶均受 Gsα 亚基激活，AC1、AC5、AC6 受 Goα 或 Giα 抑制；AC1、AC3、AC8 受 Ca2+/钙调蛋白（CaM）激活，而 AC5、AC6 则受其抑制；AC1 和 AC3 受 Ca2+/CaM 依赖性蛋白激酶（CaMK）抑制，AC9 受 calcineurin 抑制。某些 tmAC 同工酶还受 Gβγ 亚基或蛋白激酶 C（PKC）刺激或抑制。值得注意的是，除 AC9 之外，所有 tmAC 都能被一种名为 forskolin 的植物二萜强烈激活，这使得 forskolin 成为实验上激活大多数 AC 同工酶、观察下游 cAMP 响应的常用药理工具。sAC 的活性受 HCO3− 与 Ca2+ 刺激，并对生理范围内 ATP 浓度的变化敏感，因此 sAC 充当 CO2 与碳酸氢盐（从而间接 pH）的生理感受器。tmAC 与 sAC 在亚细胞定位和调控方式上的差异——前者位于质膜、受 G 蛋白调控，后者位于胞质内、对代谢物敏感——共同决定了细胞对 cAMP 信号的空间与时间调控。

在 VSMCs 中，多种 AC 同工酶同时表达，其中证据最充分的是 AC3、AC5 和 AC6。在大鼠主动脉 SMC 中，以 siRNA 选择性敲减 AC6，可使异丙肾上腺素诱导的 cAMP 增加减少约 60%；敲减 AC3 仅减少约 30%。同时，AC6 敲减还显著削弱异丙肾上腺素引起的 PKA 激活和通过 KATP 电流产生的膜超极化，提示 AC6 在 β 肾上腺素受体介导的血管舒张中起主导作用；AC3 贡献次之，提示不同 AC 同工酶在 β 受体下游 cAMP 生成中分工不同。在大鼠肺动脉 SMC（PASMCs）中，AC2、AC5/AC6 为主要同工酶，AC3 次之，AC7、AC8 表达较低。Forskolin 或稳定的前列环素模拟物 cicaprost 可刺激 PASMC 的 cAMP 水平，这些效应不被 Giα 偶联受体激动剂 carbachol 或 clonidine 影响；相反，提高胞质 Ca2+ 的 A-23187 与 thapsigargin 引起 cAMP 浓度依赖性升高。因此 Ca2+ 激活型 AC 同工酶在 PASMC 的 AC 介导活动中占主导，而 Giα 对 AC 活性的调节作用较小，这表明不同血管床中 AC 调控模式存在组织特异性。

13.3 cAMP-Hydrolyzing Phosphodiesterases (PDEs)

胞内 cAMP 浓度由其合成（AC）与水解（PDE）共同决定。PDE 不仅负责终止 cAMP 信号，还参与生成在时空上变化的 cAMP 信号格局，使细胞对多种胞外刺激作出不同的功能响应。PDE 是一个由 11 个结构相关但功能各异的基因家族（PDE1–PDE11）组成的超家族；其中 PDE4、7、8 特异水解 cAMP，PDE5、6、9 特异水解 cGMP，而 PDE1–3、10、11 则同时水解 cAMP 和 cGMP。多数家族包含多个 PDE 基因，经可变 mRNA 剪接或转录加工可产生接近 100 种同工酶。

在 VSMCs 中，cAMP 主要由 PDE4 水解，PDE1 和 PDE3 也具有功能性意义；在血管内皮细胞中则有 PDE2–4 表达。PDE 的 COOH 端催化结构域高度保守（家族间氨基酸序列同源性 25–52%），但 NH2 端调控结构域差异显著，调控结构域中包含与酶二聚化、调节性小分子结合、磷酸化和定位相关的多种元件。PDE1 家族有三个同工酶：PDE1A 和 PDE1B 优先水解 cGMP，PDE1C 以相近的 Km（0.6–2.2 μM 与 0.3–1.1 μM）水解 cAMP 和 cGMP。PDE1 调控结构域内有两个 CaM 结合位点，是哺乳动物 PDE 中唯一受 Ca2+ 调控的家族；PDE1 主要分布于胞质，其催化活性在很大程度上由胞质 Ca2+ 水平决定。PDE2 同时水解 cAMP 和 cGMP，存在 PDE2A1、A2、A3 三种形式，PDE2A1 为胞质型，另外两种为膜结合型；PDE2 的 NH2 端含两个 GAF 结构域（GAF-A、GAF-B），GAF-A 介导酶二聚化，GAF-B 结合 cGMP 后可使 cAMP 水解活性提高多达 30 倍，因此 PDE2 又被称为 cGMP 刺激型 cAMP/cGMP PDE，可视为 cAMP 与 cGMP 信号通路间 cross talk 的一种机制。

PDE3 包含 PDE3A 与 PDE3B 两个亚家族。PDE3A 主要表达于心脏、血小板、VSMC 和卵母细胞；PDE3B 主要表达于与能量稳态调节有关的细胞——脂肪细胞、肝细胞和胰岛 β 细胞。在组织中 PDE3A 既可胞质分布也可膜结合，PDE3B 主要膜结合。这些酶对 cAMP 与 cGMP 的 Km 相近（0.2 μM 与 0.1 μM），但 cGMP 的水解速率仅为 cAMP 的约 10%；cGMP 可在催化位点与 cAMP 竞争并抑制 cAMP 分解，因此 PDE3 又被称为 cGMP 抑制型 PDE。据此，cGMP 水平变化可能通过对 cAMP 分解的干扰而影响 cAMP 信号。例如乙酰胆碱（ACh）单独作用时通过激活内皮型一氧化氮合酶升高 cGMP，对绵羊肺动脉的 cAMP 水平没有影响；但 ACh 与 PGE2 同时存在时，ACh 显著放大 PGE2 引起的 cAMP 升高，二者联用引起的血管舒张大于各自单独使用时的总和。

PDE4 家族选择性水解 cAMP（Km cAMP = 2 μM；cGMP > 300 μM），故又称 cAMP 特异性 PDE。PDE4 由 A–D 四个基因编码，由于可变剪接，已鉴定出超过 25 种人类同工酶（分子量 50–125 kDa）。长型 PDE4 同工酶含有称为 upstream conserved region 1 和 2（UCR1、UCR2）的特征性氨基酸签名区；UCR1 含一个 PKA 磷酸化位点，磷酸化后解除 UCR2 的抑制效应并激活酶。短型 PDE4 缺少 UCR1，超短型仅含一半 UCR2。由于 UCR 模块介导二聚化，因此只有长型 PDE4 形成二聚体。PDE4 催化区的 COOH 端含细胞外信号调节激酶（ERK）的磷酸化位点；该位点磷酸化后激活 PDE4 短型但抑制 PDE4 长型。PDE4 在心血管、神经、免疫和炎症系统中表达丰富，在组织中根据同工酶的不同可呈膜结合或胞质分布。

PDE 在胞内的分布并非均匀。研究显示，靠近质膜和 CNG 通道附近的 PDE4 活性低于全细胞 PDE4 活性，因此由 tmAC 在 CNG 通道附近生成的 cAMP 局限于其效应器局部。在大鼠主动脉 SMC 中，β 肾上腺素受体（β-AR）激活诱导的 cAMP 增加可被 PDE1、PDE3、PDE4 水解，其中 PDE4 起主导作用；PDE4 与 PDE3 在水解 β-AR 刺激产生的近膜 cAMP 上以协同方式发挥作用。PDE4 同工酶可被 A 激酶锚定蛋白（AKAP）特异性地定位于 PKA 附近的亚细胞区室，而 PKA 是介导 cAMP 生物反应的主要酶。AKAP 是一组结构多样的蛋白质，将 PKA 锚定到不同的亚细胞位点；除锚定 PKA 外，AKAP 还作为 PKA 底物、AC、PDE 和蛋白磷酸酶的支架，由此把 cAMP 信号限制于特定的亚细胞微域（即所谓"signalosome"），cAMP 效应器与单个或一组 PDE 通过蛋白-蛋白相互作用在其中形成特异复合体。

13.4 PKA

PKA 是 cAMP 的主要下游效应器，普遍存在于哺乳动物细胞中，在胞质和胞核中均发挥作用，调节 VSMC 多种生物学过程，包括收缩、分化、增殖和代谢。PKA 为四聚体，含两个调节亚基和两个催化亚基。催化亚基由小 NH2 端叶（N-lobe）、一段短连接子和较大的羧基端叶（C-lobe）构成，C-lobe 拥有大部分催化元件和主要底物对接位点；催化亚基两端分别为 NH2 端尾（N-tail）和 COOH 端尾（C-tail）。调节亚基包含一个二聚化和 AKAP 对接结构域（D/D 结构域）、一段中部含抑制位点的连接子，其后接两个 cAMP 结合结构域（CBD-A、CBD-B）。在无 cAMP 时，调节亚基二聚体与催化亚基结合，调节亚基的抑制位点与催化亚基的活性位点裂口及连接子的羧基端段（C-linker）对接，连接子其余部分决定全酶的四级结构。当四个 CBD 全部被 cAMP 占据后，催化亚基从调节亚基上解离下来，PKA 即被激活。

PKA 调节亚基有四个同工酶（RIα、RIβ、RIIα、RIIβ），催化亚基有三个（Cα、Cβ、Cγ）。通常认为催化亚基可与所有 R 亚基二聚体自由组合。证据显示 PKA-I（RIα2C2、RIβ2C2）和 PKA-II（RIIα2C2、RIIβ2C2）全酶具有不同的生化性质：含 RIβ 的全酶比含 RIα 的全酶对 cAMP 更敏感，PKA-I 比 PKA-II 更易被 cAMP 解离，这意味着 PKA-I 在较低 cAMP 浓度下即可被激活，而 PKA-II 需要更高的 cAMP 才能完全解离。RI 对 1 型双特异性 A 激酶锚定蛋白（D-AKAP1）的亲和力比 RII 低两个数量级，因此 RII 介导的 AKAP 锚定比 RI 更为牢固。这些变体赋予 PKA 不同的 cAMP 敏感度、亚细胞定位和动力学特征，使细胞能够在不同的生理刺激下产生差异化的 PKA 反应。这些变体对血管收缩性的具体意义仍有待研究。

PKA 激活后可能通过降低胞内 Ca2+ 浓度（[Ca2+]i）引起血管舒张。在大鼠肠系膜动脉中，肾上腺髓质素引起的舒张与 cAMP 升高相关，舒张效应可被 AC、PKA 和大电导 Ca2+ 激活的 K+（BKCa）通道抑制剂减弱——这一药理学证据序列（依次阻断 AC、PKA、BKCa 均削弱舒张）提示 cAMP→PKA→BKCa 是肾上腺髓质素舒张效应的核心通路。PKA 还能激活 ATP 敏感性 K+（KATP）通道和双孔结构域酸敏感性 K+ 通道-1（TASK-1），后者在肺动脉平滑肌中的作用由 Olschewski 等报道。K+ 通道激活导致膜超极化，进而使电压依赖性 Ca2+ 通道的 Ca2+ 内流减少，从而引起血管舒张。[Ca2+]i 降低也可能源于肌浆/内质网 Ca2+-ATPase（SERCA）活性增强：SERCA 活性受限于肌浆网（SR）上的受磷蛋白（phospholamban, PLB），而 PLB 在 Ser-16 被磷酸化后其抑制作用被解除。在猫主动脉中，forskolin（AC 激活剂）和 8-Br-cAMP（cAMP 类似物）引起的舒张均伴随 PLB Ser-16 磷酸化的增加；抑制 SERCA 活性可减弱上述舒张反应，抑制 PKA 可减弱 forskolin 的舒张反应。因此，PKA 可能通过解除 PLB 对 SERCA 的抑制而促进胞质 Ca2+ 的再摄取，从而引起血管舒张。

除降低 [Ca2+]i 外，PKA 还可能通过降低肌丝对 Ca2+ 的敏感性引起血管舒张，这一过程由肌球蛋白轻链磷酸酶（MLCP）对肌球蛋白轻链（MLC）的去磷酸化增加介导。MLCP 活性可被 PKA 通过在 MYPT1（MLCP 的调节亚基）的 Ser-695 和 Ser-852（人类序列）磷酸化而激活。与 PKA 的激活作用相反，MLCP 被 Rho 激酶（ROCK）通过在 MYPT1 的 Thr-696 和 Thr-853 磷酸化而抑制。这两个 Thr 位点分别紧邻 Ser-695 和 Ser-852，因此 PKA 对 Ser-695/Ser-852 的磷酸化可阻止 ROCK 对 Thr-696/Thr-853 的磷酸化，反之亦然。PKA 还可通过在 RhoA Ser188 磷酸化来削弱 ROCK 的效应——该磷酸化使 RhoA 被 GDP 解离抑制子（RhoGDI）从膜上抽提至胞质，导致 ROCK 被 RhoA 激活的程度下降，进而对 MLCP 的抑制减弱、MLC 去磷酸化增加、血管舒张。

13.5 Epac

Epac 是 cAMP 的胞内感受器，作为 RAS 样小 GTPase 中 Rap 亚家族的核苷酸交换因子发挥作用。哺乳动物 Epac 蛋白家族有两个成员：Epac1 和 Epac2，Epac2 又因可变剪接和基因启动子差异产生 Epac2A、Epac2B 和肝特异性变体 Epac2C 三种同工酶。Epac1 在 VSMC 中表达丰富；Epac2 仅在大鼠肠系膜动脉 SMC 中检测到 mRNA，丰度约为 Epac1 的 1/200。Epac1 也表达于人脐静脉内皮细胞。Epac 蛋白由 NH2 端调控结构域和 COOH 端催化结构域组成；调控结构域中含 disheveled/Egl-10/pleckstrin（DEP）结构域，负责把结合 cAMP 的 Epac 定位到质膜，以及 cAMP 核苷酸结合结构域 CNB-B。Epac2A 还含一个额外的 CNB 结构域（CNB-A），而 Epac2C 缺少 DEP 结构域。催化结构域中含 Ras-exchange motif（REM）结构域（介导 GDP-GTP 交换）、Ras-association（RA）结构域（把 Epac1 靶向核膜、把 Epac2 靶向质膜）和 CDC25 同源结构域（CDC25HD，促进 Rap 上 GDP 与 GTP 的交换）。

在无 cAMP 时，Epac 处于自抑制构象——调控结构域折叠在催化结构域之上，遮盖活性位点。cAMP 与 CNB-B 结构域结合（Kd 2.8 μM）后引发构象变化，调控结构域从催化结构域上移开，小 GTPase Rap 蛋白即可结合到催化结构域上被激活以介导特定的 cAMP 功能；同时调控结构域内的脂质结合基序暴露，使 Epac 能被正确定位到质膜。

在 α-toxin 通透化的兔肺动脉中，Epac 选择性 cAMP 类似物 8-pCPT-2′-O-Me-cAMP（8-pCPT-AM）显著降低 U46619 诱导的收缩，并伴随 U46619 诱导的 RhoA 活性下降、MYPT1 在 Thr-696 和 Thr-853 磷酸化减少以及 MLC 磷酸化降低；这些效应不被 PKA 抑制所影响。8-pCPT-AM 引起的大鼠主动脉 SMC Rap1-GTP 增加同样不受 PKA 抑制影响，表明该通路上 Rap1 的激活不依赖 PKA。此外 8-pCPT-AM 在野生型而非 Rap1B 缺失的成纤维细胞中降低 RhoA 活性，说明 Epac→Rap1→RhoA 这一顺序对 Epac 介导的 RhoA 抑制是必需的。这些结果表明 cAMP 对 Epac 的激活可能通过抑制 RhoA 活性、增强 MLCP 活性并使 MLC 磷酸化下降，从而引起 PKA 非依赖性、Rap1 依赖性的血管舒张。

在大鼠肠系膜动脉中，8-pCPT-AM 引起的舒张被 BKCa 通道选择性抑制剂 iberiotoxin 抑制；8-pCPT-AM 还以对 iberiotoxin 和 ryanodine 敏感的方式增加分离的肠系膜肌细胞自发性瞬时外向电流（STOC）的频率和幅度；电流钳记录显示 8-pCPT-AM 引起分离肌细胞的 iberiotoxin 可抑制的超极化。STOC 的频率和幅度同时增加表明 BKCa 通道的局部 Ca2+ 释放源——ryanodine 受体——被 Epac 信号所增强，而不仅仅是 BKCa 通道自身对电压或 Ca2+ 的敏感性改变。这些数据提示 cAMP 对 Epac 的激活可能通过膜超极化引起血管舒张，而超极化源自 Epac 诱导的 ryanodine 受体局部 Ca2+ 释放激活 BKCa 通道。

cAMP 对 Epac 的激活也可通过激活内皮细胞的小电导和中电导 Ca2+ 激活的 K+ 通道以及内皮型一氧化氮合酶（eNOS）使 VSMC 超极化，从而引起血管舒张。

Fig. 13.1 总结了 cAMP 介导血管舒张的机制：cAMP 由 AC 从 ATP 合成；AC 受 Gsα 蛋白激活，受 Giα 蛋白抑制，Gsα 和 Giα 由各自受体（R）结合激动剂后激活。cAMP 主要通过 PKA 起作用：PKA 通过激活 BKCa 等 K+ 通道引起膜超极化，使电压门控钙通道（VGCC）的 Ca2+ 内流减少；PKA 还通过磷酸化 PLB 增强 SERCA 对胞质 Ca2+ 的回摄。VSMC 收缩由 Ca2+/CaM 依赖性 MLCK 激活并伴随 MLC 磷酸化增加引起，[Ca2+]i 下降则降低血管收缩力。PKA 还通过刺激 MLCP 增加 MLC 的去磷酸化而降低肌丝 Ca2+ 敏感性。ROCK 对 MLCP 有抑制作用，PKA 通过磷酸化 MLCP 的调节亚基（图中未显示）抵消这一效应，还可通过抑制 RhoA 活性削弱 ROCK（血管收缩剂结合受体时 RhoA 由 G12/13α 经 RhoGEF 激活）。cAMP 也可经 PKA 非依赖性途径与 Epac 结合，通过 Rap1 抑制 RhoA。cAMP 被 PDE（主要是 cAMP 特异性 PDE）水解为无活性的 5′-AMP。图中实线箭头表示激活，虚线箭头表示抑制。

13.6 CNG Channels

CNG 通道是被 cAMP 或 cGMP 直接结合而开放的非选择性阳离子通道。CNG 通道允许生理性 Na+ 和 K+ 通过而不对二者加以区分，对 Ca2+ 也有通透性，相对离子通透比 PCa/PNa 在 6.5 到 22 之间。但高浓度 Ca2+ 会阻断单价离子通透，该效应在负电位时更为显著，于 −40 mV 处达到峰值。CNG 通道为四聚体，每个亚基由 6 个跨膜段（S1–S6）组成，孔道区位于 S5 与 S6 之间；NH2 端和 COOH 端均在胞内，COOH 端含环核苷酸结合结构域（CNBD）。cAMP/cGMP 与 CNBD 结合后引起一系列变构转换，最终导致离子通道开放；CNG 通道要完全开放，需要四聚体的全部四个 CNBD 均被环核苷酸占据。

哺乳动物 CNG 通道分为两类亚基：A 亚基（CNGA1–4）和 B 亚基（CNGB1、CNGB3）。除 CNGA4 外，A 亚基可形成功能性同源四聚体通道；A4 和 B 亚基单独表达时不形成功能性通道，被视为调控性亚基。A4 和 B 亚基与 CNGA1–3 共表达时可形成功能性异源四聚体通道，具有原生 CNG 通道特有的属性，例如单通道闪烁、对 cAMP 敏感性增加。CNG 通道长期以来被认为表达于视网膜光感受器和嗅觉神经元中，在视觉和嗅觉信号转导中起关键作用，也在脑、睾丸和肾脏等其他组织中以低密度表达。在血管系统中，CNG A1–A4 和 B1 已在不同物种的不同血管床中被发现表达。

在小鼠主动脉中，β 肾上腺素受体激动剂异丙肾上腺素（升高 cAMP）引起的内皮依赖性舒张可被 CNG 抑制剂减弱；主动脉内皮细胞的 Ca2+ 升高也被 CNG 抑制剂抑制。在原代培养的牛主动脉内皮细胞和 H5V 内皮细胞中，cAMP 激活的阳离子电流可被 CNG 抑制剂削弱；在 H5V 内皮细胞中该电流也可被 CNGA2 特异性 siRNA 显著减弱。这些结果表明 CNG 通道（特别是 CNGA2）的激活介导了 β 肾上腺素受体激动剂诱导的内皮细胞 Ca2+ 内流，进而可能激活 eNOS 引起一氧化氮依赖性血管舒张。CNG 通道在被腺苷和 ATP 刺激诱导的 cAMP 升高激活时也观察到类似现象。

本章个人批注

第 13 章把 cAMP 信号系统按"上游合成 → 中游水解 → 下游效应器"的逻辑完整地展开，是全书关于血管舒张分子机制最系统的一章。结构上，本章实际上是把分散在前几章（Ca2+、MLCP、RhoA/ROCK、PKG）的许多核心节点重新串到 cAMP 这条主线上，因此与第 11 章胞内 Ca2+ 调节、第 12 章 MLC 磷酸化密切相关——尤其 MYPT1 上 Ser695/Thr696 与 Ser852/Thr853 这两对相邻位点的"互斥磷酸化"模型，本章用 PKA vs ROCK 的对立给出了最直观的解释，可以和第 12 章的 ROCK 通路交叉阅读。

几个我自己读时比较留意的点：(1) AC 这一节非常强调"两类结构 + 多种调控因子"的设计思想——tmAC/sAC、Gsα/Giα/Ca2+-CaM/calcineurin/PKC 等各种调控的并存，是理解 β2 肾上腺素受体、PGI2、VIP 等如何把信号汇入同一条 cAMP-PKA 通路的关键；(2) PDE 不是单纯的"关掉 cAMP 的水龙头"，而是承担"空间 cAMP 梯度"塑造的角色——signalosome、AKAP 锚定、近膜 vs 全细胞 PDE4 活性差异这些概念在后续的 cGMP/PKG 章节里应该会再出现一次；(3) Epac 这条 PKA 非依赖性通路的存在让我重新评估了"cAMP ≈ PKA"这一等同——Epac→Rap1→RhoA 的轴实际上是 cAMP 信号绕过 PKA 调控 Ca2+ 敏感性的另一条平行通路；(4) CNG 通道部分不长，但"非选择性阳离子通道 + Ca2+ 通透"这一性质暗示了 CNG 在内皮里的角色更接近"让 Ca2+ 进来"而不是经典的 K+ 通道式舒张，把这条通路和 eNOS/NO 通路串起来是这节的关键；(5) 图 13.1 几乎可以当本章的总结图来用——把 K+ 通道、SERCA、MLCP、RhoA/ROCK、Epac、PDE 都放进了同一张图里，值得专门抽时间把它和第 11、12 章的图对照看。

与上下章的衔接（一段话）

承接第 12 章对 MLC 磷酸化（MLCK–MLC–MLCP 三方平衡）的讨论，第 13 章把调节这条平衡的另一条上游信号通路——cAMP 通路——完整地呈现出来。在第 12 章里，MLCP 通过 MYPT1 的 Thr-696/Thr-853 磷酸化被 ROCK 抑制；本章则说明 PKA 能在紧邻的 Ser-695/Ser-852 位点磷酸化、解除 ROCK 的抑制，并说明 PKA 还能通过磷酸化 RhoA Ser188 把 RhoA 从膜上抽走。向下，第 14 章应进入另一条与 cAMP 平行且在血管平滑肌中同等重要的第二信使通路——cGMP/PKG，与本章形成"两条第二信使通路 × 三种共同的下游机制（K+ 通道 / SERCA / MLCP）"的对称结构，因此本章是连接钙敏感性与环核苷酸舒张机制的关键过渡章节。