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Chapter 04

作者

Giuliana Clemente University of Bristol, Bristol, UK Email: giuliana.clemente@bristol.ac.uk

本章作者来自英国 Bristol 大学细胞与发育生物学,研究方向是利用斑马鱼和果蝇模型研究先天免疫细胞在发育、伤口愈合和肿瘤发生中的迁移行为。本章也是本书中唯一明确将"数学建模"与"湿实验"结合讨论的章节。Springer Nature 2024,DOI: 10.1007/978-3-031-64532-7_4。

内容概述

本章是 6 节综合长章,系统讨论先天免疫(innate immunity)中细胞迁移的机制、信号通路、数学建模与临床意义: (1) 免疫细胞运动学基础 — 区分 amoeboid(中性粒,快、弱黏附、uropod 收缩)与 mesenchymal(巨噬,慢、强黏附、lamellipodia 驱动)两种迁移模式;中性粒依赖 Rac/Cdc42 前导边 + PTEN/uropod 后端的 PI3K/PTEN 极性梯度;Cdc42 极性决定方向,RhoA-myosin II 维持 uropod 收缩(由微管-mitochondria-Miro-dynein 系统为肌球蛋白提供 ATP);微管在巨噬中作为"罗盘"控制方向(在伤口反应中先于 actin 极化组装臂);actin 反向流动(retrograde flow) 才是迁移持续性的真正驱动力,不是 lamellipodia 表面动力学。 (2) CIL(contact inhibition of locomotion) — 微管在 CIL 触点对齐 → 接触侧 Rho 局部激活 → 极性反转;在果蝇巨噬分散中,数学模型显示 CIL 足以引导细胞分布。 (3) 先天免疫与发育 — 巨噬占胚胎 15% 细胞,主要功能远不止吞噬:组织重塑(凋亡细胞清除,与凋亡发生区共定位)、分支形态发生(沉积 collagen IV 引导 Drosophila 肾小管迁移)、血管吻合 chaperone(同时接触多个内皮 tip cell 促融合)、血管退化(WNT7b-Wnt 信号诱导内皮细胞凋亡)。 (4) 感染与抗菌反应 — 抗菌素耐药(AMR)是 2050 年预计 1000 万人/年的危机;斑马鱼是 4 周龄前的"仅有先天免疫"独特模型。中性粒通过 CXCR4-SDF1(从骨髓释放)、CXCL8/IL-8-CXCR2(趋化)、Rac2(3D 迁移)分阶段调控;Rac2 突变模拟人类 LAD 综合征;巨噬通过 CCL2-CCR2、CXCR3 募集。病原识别:TLRs(果蝇抗真菌发现)→ PAMPs;ROS/RNS 氧化爆发;中性粒 NETs/NETosis(自杀式 + 新型 vital NETosis);巨噬 pyroptosis(GSDMD-Caspase-1);肉芽肿(tuberculosis, 巨噬既保护又成 mycobacteria 储库)。 (5) 伤口反应 — Mechnikov 1882 海星幼虫观察到损伤部位的"小动体";DAMPs/alarmins(Polly Matzinger 1994 "danger model")是核心范式;ROS(H₂O₂)是最早信号,梯度在 5 min 内建立、扩展 200 μm、30 min 达峰、1 h 消退;Ca²⁺波激活 DUOX → H₂O₂;Lyn/src42A 是 H₂O₂ 的 redox sensor(经 aquaporin 进入 + 氧化保守半胱氨酸)→ Syk/Shark → PI3K 前导边极化;HMGB-1 1973 发现的非组蛋白,DAMP,通过 TLR2/4 + RAGE 促中性粒浸润和血管生成;ATP 损伤后 10⁶倍释放(胞内 10 mM vs 胞外 10 nM)→ P2Y/P2X 介导血小板聚集和 fMLP 自分泌 ATP 梯度强化;LTB4 是长程化学趋化剂,通过 BLT-1 受体驱动 swarming(早期 ATP + Ca²⁺ 通过 connexin-43 间隙连接 → 局部 LTB4 释放 → swarming 放大);中性粒与巨噬分工: 中性粒最先(分钟级)封堵破口,NET + 吞噬;巨噬随后到达,清除凋亡中性粒(efferocytosis)+ 释放 TGF-β/IL-10/IL-1Ra + 诱导中性粒"reverse migration"。 (6) 癌症与免疫的双向作用 — Dvorak 1986 名言 "Tumors are wounds that never heal"贯穿全章;DUOX-ROS 是"通用报警信号"(伤口 vs 肿瘤的同源趋化),Feng 2010 斑马鱼活体成像;CXCL8-CXCR2/1 介导中性粒到 TME;早期免疫浸润依赖 BM 已有的"gates"(HRasG12V 斑马鱼模型,非蛋白酶降解);COX-PGE2 轴是 pro-tumorigenic(Feng 2012)— 敲低 leukocyte PGE2 或 NSAIDs(aspirin)抑制肿瘤;阿司匹林在 APCmin/+ 小鼠中终身服用可预防肠癌;TIE2-ANG2-MMP9/VEGF 通路是 TEM 促血管生成核心;巨噬通过 EGF/CSF-1 旁分泌回路引导肿瘤细胞沿 collagen fibers 向血管迁移(Condeelis 2006 经典);CTC 簇(neutrophil-CTC clusters)有 ~50× 转移效率;CD8⁺ T 细胞在 <2 mm 肿瘤中数学模型预测能控瘤,>1.2×10⁸ cells 则失控——"cancer without disease"的定量解释;M1 vs M2 巨噬经典二分但实为连续谱,mesenchymal 肿瘤细胞诱导 M2;双重治疗(anti-PD-1 + 促血管正常化 + 化疗)的数学模型预测交替周期最有效;纳米技术:mannose-coated NP + poly IC 促 M2→M1;磁性 NP + 巨磁引导到达缺氧区 + cyclophosphamide 激活。

核心方程与概念

  • PI3K/PTEN 极性梯度的分子方程: $\(\nabla \text{PIP}_3 \propto \nabla(\text{PI3K}_\text{front} - \text{PTEN}_\text{rear})\)$ Rac 前导边 + RhoA 尾端 → Cdc42 决定方向 + Myosin II 收缩尾部 → 极性"锁定"于 PI3K/PTEN 的互斥分布。

  • CIL 的力学-分子耦合 (Stramer 2010 [X1]): $\(\text{微管束碰撞对齐} \to \text{接触点局部 RhoA} \uparrow \to \text{actin 应力纤维瞬时组装} \to \text{Rac 抑制} \to \text{protrusion 局部塌陷} \to \text{极性反转}\)$ Davis 2015 [X2] 提出"inter-cellular forces orchestrate CIL"——这是力学-化学耦合的细胞版本,提示"接触力场"可以独立指导群体分布。

  • Actin retrograde flow 作为迁移持续性的真正驱动力 (Yolland 2019 [X3]): $\(\text{actin 聚合速率} \neq \text{迁移速率} \to \text{retrograde flow 速率} = \text{持续性指标}\)$ 颠覆传统"lamellipodia 越活跃迁移越快"假说,提示actin 流的稳定性而非振幅是方向持续性的核心。

  • 微管-mitochondria-Miro-dynein 系统的 ATP 输送逻辑 (Morlino 2014 [X4]): $\(\text{微管极性} \to \text{dynein 驱动 mitochondria 向 uropod} \to \text{局部 ATP} \uparrow \to \text{MLC 磷酸化} \to \text{actomyosin 收缩}\)$ 这揭示了"细胞极性"不仅是分子分布不对称,也是能量代谢的空间不对称。

  • DAMP 信号的时间-空间层次 (Fig. 3, "alarm hierarchy"): $\(\underbrace{\text{Ca}^{2+} \text{ wave (秒级)}}_{\text{最早期}} \to \underbrace{\text{H}_2\text{O}_2 \text{ gradient (5-30 min, 200 μm)}}_{\text{中性粒 chemotaxis}} \to \underbrace{\text{HMGB-1 (小时级)}}_{\text{持续炎症}} \to \underbrace{\text{LTB4 (持续 swarming)}}_{\text{放大}}\)$ "早期-中期-长期"的三层 DAMP 协作是免疫细胞时空分辨的分子基础。

  • H₂O₂ 跨膜与 Lyn 氧化的分子逻辑 (Yoo 2011 [X5]): $\(\text{细胞外 H}_2\text{O}_2 \xrightarrow{\text{aquaporin-3}} \text{细胞内 H}_2\text{O}_2 \to \text{Lyn Cys 氧化} \to \text{Syk/Shark} \to \text{PI3K 前导边} \to \text{迁移}\)$ 这是"氧化还原信号"作为迁移诱导剂的最直接的分子路径。

  • HMGB-1 的多靶点机制 (Park 2004 [X6]): $\(\text{HMGB-1}_{\text{nuclear}} \to \text{HMGB-1}_{\text{extracellular (DAMP)}} \to \begin{cases} \text{TLR2/4} \to \text{NETs} \to \text{抗菌} \\ \text{RAGE} \to \text{内皮血管出芽} \\ \text{TLR4} \to \text{c-kit+ 心肌干细胞激活} \to \text{再生} \end{cases}\)$ HMGB-1 是少见的"既是损伤信号又是再生信号"的双功能分子。

  • LTB4-swarming 的 ATP-Ca²⁺ relay 模型 (Poplimont 2020 [X7]): $\(\underbrace{\text{ATP}}_{\text{早期}} \to \underbrace{\text{Cx43 hemichannel}}_{\text{中性粒互连}} \to \underbrace{\text{Ca}^{2+} \text{ wave}}_{\text{传播}} \to \underbrace{\text{LTB4 局部释放}}_{\text{趋化} \to \text{招募远端中性粒} \to \text{swarming}}\)$ 这是正反馈放大的范例: 早期信号(ATP)通过细胞间通讯放大成 swarming。

  • 伤口微环境中的"逆迁移"机制 (Wang 2017 [X8]): $\(\text{中性粒} \xrightarrow{\text{趋化到伤口}} \text{执行抗菌} \xrightarrow{\text{巨噬物理接触 + 排斥}} \text{reverse migration 回血管}\)$ "逆迁移"是中性粒撤离伤口的主动机制,不是被动凋亡。这是炎症消退的关键步骤。

  • "Tumors are wounds that never heal" (Dvorak 1986): $\(\text{wound inflammation} \equiv \text{tumor initiation (DAMP/ROS/chemokine 同源机制)}\)$ $\(\text{healing termination failure} \to \text{慢性 wound-like TME} \to \text{肿瘤可持续生长}\)$ 这把伤口-肿瘤-慢性炎症三个表面无关的现象统一在一个分子框架下。

  • Condeelis 2006 巨噬-肿瘤 EGF/CSF-1 旁分泌环 [X9]: $\(\text{巨噬}_{\text{血管旁}} \xrightarrow{\text{EGF}} \text{肿瘤细胞}_{EGFR} \xrightarrow{\text{CSF-1}} \text{巨噬} \to \text{正反馈}\)$ $\(\to \text{肿瘤沿 collagen 纤维向血管定向迁移} \to \text{intravasation}\)$ 这是巨噬-肿瘤"双人舞"的经典模型,也是"细胞间通讯 → 方向性迁移"的范例。

  • CD8⁺ T 细胞控制肿瘤的数学模型 (基于 Lee et al. 模型): $\(T_{\text{tumor}} = 2\,\text{mm} = 6 \times 10^5 \text{ cells: 平衡 (cancer without disease)}\)$ $\(T_{\text{tumor}} = 1.2 \times 10^8 \text{ cells: T 细胞失控}\)$ "免疫编辑"理论的定量表述:小肿瘤 T 细胞足够,大肿瘤 T 细胞被 TGF-β / T-reg 抑制。

  • TME 治疗的"双重周期"数学预测 (Mahlbacher 2018 [X10]): $\(\text{周期 1: 免疫激活 (促 TEM + 血管)} \to \text{周期 2: 化疗 (药物随正常血管进入)}\)$ 比连续单一治疗的预测效果更佳——这是临床试验设计直接受益于数学模型的范例。

关键结论

  • 免疫细胞迁移 = amoeboid/mesenchymal 双模式,但实际可切换:中性粒通常 amoeboid(快、~9 μm/min,无 focal adhesion),巨噬通常 mesenchymal(慢、~1 μm/min,focal adhesion),但两种模式可在不同微环境/激活状态下互换——这是免疫细胞"环境响应"的核心。

  • 微管 ≠ 仅是"骨架":在巨噬中微管先于 actin 极化(伤口反应中先组装臂),是"罗盘"决定方向;mitochondria 通过 Miro-dynein 沿微管极性分布,在 uropod 局部供 ATP 维持 actomyosin 收缩。

  • CIL 是细胞群体分散/组织的核心力学-化学耦合:微管对齐 → 局部 Rho → 接触点 protrusion 消失 → 极性反转。CIL 在发育中引导巨噬分散,在炎症中维持巨噬簇——是同一机制的相反输出。

  • ROS/DAMP 是一套有时间-空间层次的信号语言:Ca²⁺ (秒) → H₂O₂ (分钟-200 μm) → HMGB-1 (小时) → LTB4 (持续 swarming)。每个时间尺度对应不同免疫细胞类型和功能。

  • "Tumors are wounds that never heal" 范式有分子基础:Dvorak 1986 看似诗意,但 Feng 2010 斑马鱼活体成像证实 DUOX-ROS、CXCL8-CXCR2、PGE2 等分子机制在伤口和肿瘤中完全同源。伤口的"不可愈合"= 肿瘤的"持续生长"。

  • COX-PGE2 是 pro-tumorigenic 关键节点:Feng 2012 斑马鱼证明 leukocyte-derived PGE2 滋养肿瘤;APCmin/+ 鼠中 aspirin 终身服用可防肠癌;人群队列研究支持低剂量 aspirin 长程防癌。这把"非甾体抗炎药"从镇痛药变成化学预防候选。

  • 巨噬-肿瘤 EGF/CSF-1 旁分泌环是定向转移引擎:Condeelis 2006 在小鼠乳腺脂肪垫活体成像证实巨噬引导肿瘤细胞沿 collagen 纤维向血管迁移;抑制 EGFR 或清除巨噬均阻断 intravasation。

  • CTC 簇是转移效率倍增器:neutrophil-CTC clusters 比单细胞 CTC 转移效率高 ~50×;neutrophil 提供细胞周期支持 + 免疫逃逸;platelet 提供结构支撑 + MHC-I "伪正常"伪装。

  • "Cancer without disease" 的定量解释:CD8⁺ T 细胞对 <2 mm(6×10⁵ cells)肿瘤有效但对 >1.2×10⁸ cells 失效,这解释了为什么体内微观肿瘤可长期存在而不发病(Folkman & Kalluri 2004 [X11])。

  • M1/M2 巨噬二分是过度简化,实际为连续谱 + 高度可塑:mesenchymal 肿瘤细胞诱导 M2;epithelial 肿瘤细胞诱导 M1;强制 M2→M1 极化比单纯抑制巨噬浸润更优;但已建立的 M2 极化"稳态"很难逆转。

  • TIE2 表达巨噬(TEM)是肿瘤血管生成的"另类"路径:不同于经典的 VEGF 通路,TEM 通过 ANG2 → MMP9 + VEGF-A 促血管,抗 ANG/TEM 治疗(而非抗 VEGF 单一)是潜在策略。

  • 巨噬纳米技术 = 下一代肿瘤治疗:mannose-coated NP 选噬 M2 + poly IC 促 M1;磁性 NP + 磁场引导巨噬到缺氧区;NPL-Ms 把巨噬本身作为药物递送载体。这些是真正"细胞治疗 + 纳米技术"融合的范例。

  • "Reverse migration" = 炎症消退机制:中性粒不靠凋亡而靠主动逆迁移回血管(由巨噬接触排斥诱导),这是炎症消除的"活细胞层"机制——对慢性炎症治疗有直接含义(避免中性粒异常持续)。

  • "净伤口愈合"的两难:过度 vs 不足:chronic wounds(>6 周)与 hypertrophic scarring 是同一硬币两面;数学模型(Saiko 2016)显示局部 O₂ 压力是核心调节器——hyperbaric oxygen therapy (HBOT)有最佳"窗口"。

挑战和开放性问题

  1. M1/M2 巨噬连续谱的"分子坐标":目前常用 iNOS/IL-6(M1) vs CD206/Arg1(M2)的离散标记,但实际上巨噬极化是连续流形,缺乏统一的分子分类。
  2. CTC-中性粒簇形成的分子粘附机制:中性粒通过什么受体与 CTC 黏附?抑制哪些黏附分子可阻断簇形成而不影响中性粒正常功能?
  3. NETosis 在肿瘤中的双面性:NETs 可包裹循环肿瘤细胞抑制转移,也可作为"陷阱"捕获休眠癌细胞并促其苏醒——其净效应依上下文未知。
  4. M2 → M1 极化的"窗口期":Li 2019 模型预测一旦稳态 M2 主导建立,极化转换困难;但何时干预最有效?早期还是中期?
  5. HMGB-1 的"还原 vs 氧化"双形式:HMGB-1 的还原态(再生)和氧化态(炎症)作用相反;细胞如何调控释放哪种形式?
  6. 巨噬-肿瘤旁分泌环路的可中断点****:EGF-CS F1 环路是双重正反馈,但是否有"短反馈"或负调控点(类似 ACE2 之于 ACE)?若能找到可设计双重抑制策略。
  7. "Cancer without disease" 的临床检测:Folkman & Kalluri 2004 理论预测大多数人携带微观肿瘤,但终生不发病。如何在临床上检测这些微观肿瘤并决定是否干预?
  8. NETosis 抑制剂的临床转化:NETs 在 sepsis、自身免疫、肿瘤中都是"双刃剑";如何选择性抑制 NETs 而不破坏基础抗感染功能?
  9. "Reverse migration"在慢性炎症中的失效机制:类风湿关节炎、Crohn's 病等慢性炎症中,中性粒为何不"reverse migration"而是持续浸润?这与"终止信号"缺失有关还是迁移模式锁定?
  10. 伤口-肿瘤-慢性炎症的"统一分子标志":三者共享 DAMPs/ROS/CXCL8/TGF-β,但临床分期完全不同;能否找到区分"急性伤口"vs "慢性炎症"vs "早期肿瘤"的分子标志?
  11. 斑马鱼先天免疫模型的转化局限:4 周龄前的"仅有先天免疫"虽方便,但与人类长期感染(数月-数年)的免疫动力学差异未充分量化。
  12. HP 时间分辨率下的"单细胞-群体"过渡:目前 3D 活体成像时空分辨率有限(分钟-微米),如何捕捉"中性粒碰撞 → CIL 极性反转"的亚分钟动力学?

个人反思与批判性分析

1. 章节的"斑马鱼-果蝇"双模式 — Clemente 把斑马鱼(脊椎动物)+ 果蝇(无脊椎动物)作为互补模型: - 斑马鱼贡献:脊椎动物 + 透明 + 4 周龄前纯先天免疫——可独立研究先天免疫在体内的完整动力学 - 果蝇贡献:遗传可追踪 + 大量遗传工具——可解析分子机制 + 揭示"进化保守性" - 这种双模型策略对复杂系统(免疫网络、发育)研究值得借鉴——本人做血管生物力学也面临"人血管 in vivo 难观测、动物模型难转化"的问题,本章的双模型逻辑可参考。

2. 数学建模的"新角色"是本章最大亮点 — Clemente 用约 30% 篇幅讲建模: - 从机制到预测:Saiko 2016 预测"局部 O₂ → 炎症时长" + "hyperbaric O₂ 最佳窗口" - 从机制到临床设计:Mahlbacher 2018 预测"交替周期免疫 + 化疗"优于"单药连续" - 从机制到剂量:Mathematical model 预测 EGF 最优治疗浓度 - 这把"湿实验 + 干实验"从"互补"上升到"协同",是计算生物学的现代范式。本人做 SMC 表型转换和血管重塑时,应借鉴此模式——把 ODE/PDE 模型用于"机制验证 + 临床预测"双重角色。

3. "Tumors are wounds that never heal" 范式的深度 — 这不只是修辞,Dvorak 1986 揭示: - 肿瘤反复利用伤口愈合分子(PDGF/VEGF/TGF-β/coagulation cascade) - 伤口"永不停息"= 持续 DAMPs/巨噬 M2/血管生成/TGF-β = TME - 临床含义:抗炎药(aspirin/NSAIDs)有抗肿瘤预防潜力,可能与 COX-PGE2 抑制 leukocyte-derived trophic signals 有关 - 本章把这个范式从"概念"推到"分子机制 + 治疗应用",非常系统

4. 与本人血管生物力学研究的具体连接: - TEM 促肿瘤血管生成(ANG2 → MMP9 + VEGF-A)是动脉粥样硬化斑块血管新生(angiogenesis in plaques)的同源机制,本人研究 SMC 表型转换与 TIE2⁺ 巨噬协同可能影响斑块稳定性 - NETosis / 血小板-CTC 簇与动脉血栓形成机制(neutrophil extracellular traps in thrombosis, von Brühl 2012 Nat Med 等)同源,血管生物力学中 NETs 在 AAA(腹主动脉瘤)中的作用已是研究热点 - DAMP 信号(HMGB-1 在血管损伤中的作用)与动脉粥样硬化斑块炎症直接相关 - TGF-β/IL-10 慢性炎症 → 巨噬 M2 极化与本人研究的血管钙化中osteogenic switch 共享 TGF-β/Smad 轴 - "Cancer without disease" 数学模型思路(临界尺寸)与血管重塑中的critical shear stress阈值有结构同源——临界物理量决定状态转换

5. 章节回避/未深入的盲点: - 淋巴细胞(Lymphocytes)的迁移机制:本章集中在先天免疫(中性粒、巨噬),对 T/B 细胞迁移(adaptive immunity)基本未涉及——这与 Ch 4 章名"Cell Migration in Immune Responses"略不符,读者需看 Ch 7 之后的章节补充。 - 免疫细胞在淋巴器官中的迁移:淋巴结、脾的 T/B 细胞归巢、滤泡辅助等过程在 Ch 4 几乎未触及 - 免疫细胞的"非免疫"功能:神经发育中的 microglia 突触修剪、肠道免疫-神经 crosstalk 等前沿未涉及 - 嗜酸性粒细胞/嗜碱性粒细胞/肥大细胞:经典免疫学中的"过敏和抗寄生虫"通路在 Ch 4 完全缺席 - 年龄与免疫迁移:免疫衰老(immunosenescence)如何改变中性粒/巨噬迁移?这与 Ch 3 慢性伤口、SASP 都有连接,本章未涉及

6. 章节对"抗药性"和"治疗失败"的论述略显单薄:虽然提了 M2 巨噬主导肿瘤、CAF 抑制 T 细胞等机制,但临床上免疫治疗耐药的最新进展(ICB 耐药机制如 JAK 缺失、β2-M 缺失、PTEN 缺失等)在 Ch 4 缺乏深度。

7. 个人对"巨噬靶向治疗"的反思:本章提出"促 M2→M1 而非抑制巨噬浸润"是合理策略,但实际上临床转化困难——M2/M1 极化在体内是连续谱而非离散状态,缺乏药物-靶点对应。可能需要单细胞蛋白组学/代谢组学等更高分辨技术来明确"促极化药物"的目标表型。

8. 章节引用与文献覆盖: - 主要文献覆盖至 2022 年(部分 2023) - 关键 reference 出现频繁:Lee & Mararani (immune cell tumor) 2022,Weavers 2016 (DAMP systems),Yoo 2011 (Lyn redox sensor),Condeelis & Pollard 2006 (macrophage-tumor chemotaxis) - 缺少对单细胞测序时代免疫迁移研究的引用(2020 后),可能是写作时间的限制

重要参考文献

[X1] Stramer B, Moreira S, Millard T, Evans I, Huang CY, Sabet O, Milner M, Dunn G, Martin P, Wood W. Clasp-mediated microtubule bundling regulates persistent motility and contact repulsion in Drosophila macrophages in vivo. J Cell Biol 2010;189(4):681-9. doi:10.1083/jcb.201002129. PMID: 20457762 [X2] Davis JR, Luchici A, Mosis F, Thureau S, Bove A, Berry H, Dhooge A, Koeck P, Martin P, Mao B. Inter-cellular forces orchestrate contact inhibition of locomotion. Cell 2015;161(2):361-73. doi:10.1016/j.cell.2015.02.015. PMID: 25799385 [X3] Yolland L, et al. Persistent and polarized global actin flow is essential for directionality during cell migration. Nat Cell Biol 2019;21(11):1370-81. doi:10.1038/s41556-019-0411-5. PMID: 31685996 [X4] Morlino G, Barreiro O, Baixauli F, Robles-Valero J, Stein M, de la Serna A, Sanchez-Madrid F, Burridge K, Martin-Cofreces NB. Miro-1 links mitochondria and microtubule Dynein motors to control lymphocyte migration and polarity. Mol Cell Biol 2014;34(8):1412-26. doi:10.1128/MCB.01377-13. PMID: 24492963 [X5] Yoo SK, Starnes TW, Deng Q, Huttenlocher A. Lyn is a redox sensor that mediates leukocyte wound attraction in vivo. Nature 2011;480(7375):109-12. doi:10.1038/nature10632. PMID: 22101434 [X6] Park JS, Svetkauskaite D, He Q, Kim JY, Strassheim D, Ishizaka A, Abraham E. Involvement of toll-like receptors 2 and 4 in cellular activation by high mobility group box 1 protein. J Biol Chem 2004;279(9):7370-7. doi:10.1074/jbc.M306793200. PMID: 14660645 [X7] Poplimont H, et al. Neutrophil swarming in damaged tissue is orchestrated by connexins and cooperative calcium alarm signals. Curr Biol 2020;30(14):2761-76.e7. doi:10.1016/j.cub.2020.05.030. PMID: 32531283 [X8] Wang J, Hossain M, Thanabalasuriar A, Gunzer M, Meininger C, Kubes P. Visualizing the function and fate of neutrophils in sterile injury and repair. Science 2017;358(6359):111-6. doi:10.1126/science.aam9690. PMID: 28983053 [X9] Wyckoff J, Wang W, Lin EY, Wang Y, Pixley F, Stanley ER, Graf T, Pollard JW, Segall J, Condeelis J. A paracrine loop between tumor cells and macrophages is required for tumor cell migration in mammary tumors. Cancer Res 2004;64(19):7022-9. doi:10.1158/0008-5472.CAN-04-1449. PMID: 15466195 [X10] Mahlbacher G, Curtis LT, Lowengrub J, Frieboes HB. Mathematical modeling of tumor-associated macrophage interactions with the cancer microenvironment. J Immunother Cancer 2018;6(1):10. doi:10.1186/s40425-017-0314-5. PMID: 29378655 [X11] Folkman J, Kalluri R. Cancer without disease. Nature 2004;427(6977):787. doi:10.1038/427787a. PMID: 14985739 [X12] Dvorak HF. Tumors: wounds that do not heal. Similarities between tumor stroma generation and wound healing. N Engl J Med 1986;315(26):1650-9. doi:10.1056/NEJM198612253152606. PMID: 3537791 [X13] Feng Y, Renshaw S, Martin P. Live imaging of tumor initiation in zebrafish larvae reveals a trophic role for leukocyte-derived PGE(2). Curr Biol 2012;22(13):1253-9. doi:10.1016/j.cub.2012.05.010. PMID: 22658593 [X14] Feng Y, Santoriello C, Mione M, Hurlstone A, Martin P. Live imaging of innate immune cell sensing of transformed cells in zebrafish larvae: parallels between tumor initiation and wound inflammation. PLoS Biol 2010;8(12):e1000562. doi:10.1371/journal.pbio.1000562. PMID: 21179501 [X15] Matzinger P. Tolerance, danger, and the extended family. Annu Rev Immunol 1994;12:991-1045. doi:10.1146/annurev.iy.12.040194.005015. PMID: 8011301 [X16] Niethammer P, Grabher C, Look AT, Mitchison TJ. A tissue-scale gradient of hydrogen peroxide mediates rapid wound detection in zebrafish. Nature 2009;459(7249):996-9. doi:10.1038/nature08119. PMID: 19536255 [X17] Lammermann T, et al. Neutrophil swarms require LTB4 and integrins at sites of cell death in vivo. Nature 2013;498(7454):371-5. doi:10.1038/ncb2690. PMID: 23708969 [X18] Hanahan D, Coussens LM. Accessories to the crime: functions of cells recruited to the tumor microenvironment. Cancer Cell 2012;21(3):309-22. doi:10.1016/j.ccr.2012.02.022. PMID: 22439926